MEN2A——基于RETc.GA突变的治疗策略
合作单位：ChineseAcademyofMedicalSciencesandPekingUnionMedicalCollege
参考文献：ZhaoL,YangKQ,FanP,etal.RETc.GAandNovelSLC12A3MutationsinFamilialPheochromocytomas.Genes,May12;13(5):.doi:10./genes13050.PMID:;PMCID:PMC.(IF=4.)
背景：
PHEO（嗜铬细胞瘤，OMIM#）是一种源自肾上腺髓质的神经内分泌肿瘤，可以是散发性的，也可以是家族性的。这是一种罕见的继发性高血压病因。PHEO患者通常表现为剧烈头痛、心悸和出汗过多的典型三联征，这些症状总是发作性的。手术切除功能性肿瘤（也称为产生儿茶酚胺的肿瘤）已被证明可有效缓解症状和改善预后。
家族性PHEO作为常染色体显性遗传性状遗传。Neumann及其同事指出，超过35%的PHEO可归因于种系致病突变。位于染色体10q11.2上的RET（转染过程中重排）原癌基因于年首次被发现与遗传性PHEO相关。此后，已检测到至少20个易感基因具有种系突变，如NF1（神经纤维瘤病1型）、TMEM（跨膜蛋白）、FH（富马酸水合酶）、VHL（VonHippel-Lindau）等。现在建议所有PHEO患者进行基因测序。遗传性PHEO也可能是特定临床综合征的一种表型，如多发性内分泌肿瘤2A型和B型（MEN2A，OMIM#和MEN2B，#）、NF1（OMIM#）和VHL综合征（OMIM#）。
在这项研究中，对PHEO患者进行了基因筛查，发现他们携带RETc.GA突变，并最终被诊断出患有家族性MEN2A。近年来，关于影响PHEOs在MEN2A中外显率的因素存在很多争议。例如，Mucha等报道，MEN2A中PHEO的外显率和诊断年龄与RET突变位置相关：RET外显子11的外显率估计为47%，外显子10携带者的外显率为30%。Castinetti等表明，即使在RET密码子突变携带者中，外显率也可能因患者来源的地理区域而有很大差异，这表明未知修饰因子的作用。在这项研究中，发现MEN2A家族携带RETc.GA突变，旨在确定该突变对MEN2A中PHEO外显率的影响。除了RETc.GA突变外，还发现患者在SLC12A3中还存在一种新的变异（溶质载体家族12成员3），该变异与Gitelman综合征高度相关（GS，OMIM#）。通过使用蛋白质结构预测和比较模型来评估SLC12A3突变体的功能。目前，尚无研究报道同一患者或家庭同时发生RET和SLC12A3突变。本工作是第一个在MEN2A家族中描述化合物RETc.GA和SLC12A3突变的人。该研究还强调了基因检测对疾病预防、治疗和预后的重要性。
方案设计：
为了确定SLC12A3蛋白及突变体的三维结构，深入研究蛋白的结构与功能的关系。通过与魔德科技技术团队沟通，拟通过同源模建方法对SLC12A3的蛋白结构进行了预测，并利用PROCHECK（3.5.4版）和Verify3D程序对优化的蛋白质模型进行评估，以确保蛋白质结构合理
主要结果：
对先证者进行WES分析。经过数据筛选，本工作在RET的外显子11中检测到c.GA[p.CysTyr，密码子中的氨基酸从半胱氨酸（Cys）变为酪氨酸（Tyr）]突变（图1），以及SLC12A3外显子26的新变异，c._delinsCAG（图2）。没有发现其他有意义的突变。Sanger测序发现，母本携带与先证者相同的突变。RET基因中的错义突变将编码区的碱基从G变为A，从而将翻译的氨基酸从半胱氨酸变为酪氨酸。SLC12A3基因的移码缺失变体涉及编码区中碱基至的缺失以及在该位置插入CAG碱基。根据Mutalyzer（